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凋亡和焦亡的区别
细胞凋亡与细胞焦亡同为细胞程序性死亡，均可出现染色质凝聚、核浓缩以及均依赖半胱天冬酶，但二者在诸多方面都大相径庭，其具体区别如下：
细胞凋亡 | 细胞焦亡 | ||
概念 | 在一定的生理或病理条件下，受内在遗传机制控制，按照自身程序主动性、生理性的死亡过程 | 又称细胞炎性坏死，炎性小体引发的一种程序性细胞死亡方式 | |
诱导刺激 | 生理或病理 | 病理性刺激 | |
特征 | 无炎症反应、凋亡小体形成 | 明显的炎症反应、焦亡小体形成 | |
形态学 | 细胞 | 缩小 | 肿胀膨大 |
细胞膜 | 结构完整 | 破裂 | |
细胞器 | 完整 | 变形 | |
DNA | 降解为180-200bp及其整倍数的片段 | 随机降解 | |
核形态 | 核固缩(边缘染色质不可逆的凝结)和DNA片段化 | 染色质浓缩、没有DNA断裂 | |
分子机制 | Caspase-2/-3/-6/-7/-8/-9/-10，其中,caspase-3为细胞凋亡的主要调控因子 | 人源性的caspase-1/-4/-5和鼠源性的caspase-1/-11 | |
细胞焦亡检测
原理：炎性小体激活可控制caspase-1的活化和裂解,导致效应性促炎细胞因子,如IL-1β前体和IL-18前体的成熟和释放,引发一系列炎症反应。焦亡相关的caspase是裂解GSDMD导致细胞焦亡的zui强因素。
1. 形态变化
» 扫描电镜观察细胞形态
» TUNEL染色
» 免疫荧光染色（gasdermin D，GSDMD）
2. 检测焦亡相关蛋白
» 检测焦亡相关基因或蛋白的表达水平（Caspase-1、4、5、11；GSDMD等）
» ELISA试剂盒检测炎症因子的水平（IL-1β、IL-18等）
» CCK-8测定细胞活力
细胞凋亡检测
1. 凋亡早期
◆ 检测指标
◆ 原理
位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（Phosphotidylserine, PS）由细胞膜的内侧翻转到细胞膜表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合，通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞的胞膜结合。
◆ 客户数据
2. 凋亡中期
◆ 检测指标
◆ 原理
线粒体膜电位（△Ψm ）的丢失导致线粒体膜中线粒体通透性转换孔的开放，细胞色素C（Cytochrome C）被释放到细胞浆中，致使Caspase被激活从而诱导细胞凋亡。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针，表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内，JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光（Ex=585 nm，Em=590 nm）；而凋亡细胞，线粒体跨膜电位去极化，JC-1从线粒体内释放，浓度降低，逆转为发射绿色荧光的单体形式。线粒体的去极化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。
◆ 客户数据
图4.荧光探针检测U87细胞样本实验结果
3. 凋亡晚期
◆ 检测指标
◆ 原理
染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将荧光素/酶标记的dUTP结合到DNA的3-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)。
◆ 客户数据
上海起发生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）属于上海起发实验试剂有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起发生物自有品牌，打造优质的生物试剂民族自有品牌。降低成本的同时，把好生物产业链中的国产生物试剂品质关。未来让每一个和我们一样拥有民族情怀的企业，共同创世界优秀的中国生物制造企业，圆梦中国。
