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太实用了!转染试剂常见问题大全,你想要的答案这里都有

更新时间:2023-08-24      点击次数:86

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Q1:
配制核酸转染试剂复合物时能否有血清的存在?

血清的存在会影响脂质体的形成,建议配制核酸转染试剂复合物时采用无血清培养基(一般推荐MEM 培养基)。


Q2:

转染试剂能否冻存?

不能。本试剂一定要4 ℃保存,要注意避免反复多次长时间开盖,长时间开盖会导致脂质体氧化而影响转染效率。

Q3:

使用脂质体核酸转染试剂需要注意什么?

1)细胞铺板密度较高,以90%-95%为佳;

2)使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率;

3)制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂;

4)转染的时候培养基中不能添加抗生素;

5)试剂应该在4度保存,要注意避免多次反复长时间开盖;

6)初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA 和转染试剂的比例,通常推荐是1:2-1:3。

Q4:
转染后需要进行终止吗?

不需要。脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液,为了保证细胞正常生长所需的营养,需要在4~6小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要进行再次换液。

Q5:

若想提高转染效率,应该注意什么?

1)转染时细胞的密度,90%-95%。

2)转染时,核酸和脂质体稀释液要用MEM无血清培养基。

3)转染后4-6h可选择换液。

Q6:

可否进行DNA和siRNA的共转染?效果如何?

DNA和siRNA的共转染时候,siRNA转染效率差。

Q7:

转染试剂可否进行慢病毒包装的转染呢?

慢病毒包装是可以的,但是在进行慢病毒包装的效率不一定和转染的效率有关,同时还跟包装质粒的选择和质粒间的比例有关系。

 

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