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T7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:190

T7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)说明书

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产品详情
T7 RNA Polymerase,即T7 RNA聚合酶,是T7噬菌体DNA编码的酶,对T7启动子序列具有高度特异性 。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5′→3′的RNA聚合酶活性,可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
特点
该酶对T7启动子具有高度特异性,不识别其它生物来源的启动子。可以识别修饰的核苷酸,例如生物素标记、荧光素标记、放射性同位素、地高xin标记dNTP,用于各种标记RNA的合成,进行下游实验。
来源:携带T7 RNA聚合酶基因的E. coli
分子量:99 kDa
纯度:≥90%
比活:1 KU/μL
比活单位定义:在37℃、1小时内使1 nmol的CMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位
存储缓冲液:50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,20 mM β-ME,1 mM EDTA,50% 甘油,0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.9
产品包装规格及组成
产品编号产品名称规格产品组成

10×Transcription BufferMg 2+ (400 mM)T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)
78MRNA-1104AT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)50 KU150 uL100 uL50 uL
78MRNA-1104BT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)200 KU500 uL500 uL200 uL
78MRNA-1104CT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)1000 KU1.25 ml×22 mL1 mL
质量控制
1. SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,毛细管电泳检测纯度在95%以上;
2. 酶动力学实时荧光法显示无DNA酶及RNA酶污染。
应用举例
【RNA 体外转录合成 】
1. 在RNase free的离心管中加入右侧表格中各组分配制反应体系;
2. 将上述反应液混合均匀,低速离心至管底,37 ℃孵育4个小时。若转录本长度小于100 nt,增加反应时间至4-8个小时;
3. 转录后取样品进行凝胶电泳,取样1 μL稀释到5 μL,然后用1%的琼脂糖凝胶进行检测,以确定转录是否成功;
4. 反应完成后,加入DNase Ⅰ(RNase free),37 ℃孵育30 min以去除模板DNA
组分体积
DNase/RNase-Free WaterUp to 20 uL
ATP/CTP/GTP/UTP (100 mM each)2 uL each
10×Transcription Buffer2 uL
DNA template0.5 ~ 2 ug
RNase Inhibitor (40 U/u L)0.5 uL
Inorganic Pyrophosphatase (0.1 U/uL)0.5 uL
T7 RNA Polymerase (1 KU/uL)0.2 ~ 1 uL
Mg 2+ (400 mM)1 uL
Total Volume20 uL
运输与保存
运输条件:蓝冰/干冰运输
保存温度:-20 ℃以下保存
避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中,shou次使用时建议进行分装。
产品效期:12个月
注意事项
1. 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20 ℃保存;
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
3. 产品仅供研究使用。


货号品名规格品牌
78MRNA-1104AT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)50 KU

BIOHUB

78MRNA-1104BT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)200 KU

BIOHUB

78MRNA-1104CT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)1000 KU

BIOHUB







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