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热启动直扩型Taq DNA聚合酶说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:148

热启动直扩型Taq DNA聚合酶说明书

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产品详情

本酶为Taq-D DNA聚合酶(KlenTaq1)的热启动型,需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活。Taq-D DNA聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶(删除了5’ 外切酶结构域)。该酶具有5’→3’聚合酶活性,无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR本酶经基因工程改造,尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性(SNP)分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/min(72℃)。

特点

浓度2.5U/μl活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,将10 nmole脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量,定义为一个活性单位(U)。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol.

产品包装规格及组成

Component

78DC10013-250u

78DC10013-250U×5

78DC10013-1250U×478DC10013-2500U×5

HS Taq-D DNA polymerase(KlenTaq1)

250U

250U×5

1250U×4

2500U×5

10×Taq-D Buffer

0.5 ml×1

0.5 ml×5

1.0 ml×10

1.0 ml×25


适用范围

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系, 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。

组份

体积/μl

终浓度

10×Taq-D Buffer

5

dNTPs(2.0 mM)

5

0.2 mM

引物F(10 μM)

1.5

0.3 μM

引物R(10 μM)

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

HS Taq-D(2.5U/μl)

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

     









*DNA template可参照如下标准(50 μl PCR体系):


人类基因组DNA

0.1 μg-1 μg

λDNA

0.5 ng-5 ng

质粒DNA

0.01 ng-1 ng

大肠杆菌DNA

10 ng-100 ng


 







PCR反应条件

95℃

5 min


95℃

15 sec


55~72℃

20 sec

30 Cycles

72℃

1 min/kb


72℃

5 min







注意事项


     本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周,扩增活性无明显改变;但强烈建议不要在室温下长期放置,用毕放回-20度。



货号品名规格品牌
78DC10013-250U热启动直扩型Taq DNA聚合酶250U

BIOHUB

78DC10013-250U×5热启动直扩型Taq DNA聚合酶250U×5

BIOHUB

78DC10013-1250U×4热启动直扩型Taq DNA聚合酶1250U×4

BIOHUB

78DC10013-2500U×5热启动直扩型Taq DNA聚合酶2500U×5

BIOHUB





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