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BIOHUB无血清细胞冻存液说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:209

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产品描述
细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术,是细胞长期保存的重要手段。细胞冻存液通过冷冻保护剂在冻存过程中对细胞进行保护,以减少或防止冷冻冰晶对细胞造成的损伤。
BIOHUB 无血清细胞冻存液(药用级)是一款采用医用原料无血清、无需程序降温的细胞冻存液,广泛适用于多种哺乳动物细胞(肿瘤细胞和常规细胞)的冻存。该冻存液特别优化的配方含有双重保护细胞的成份,从细胞内和细胞外同时保护细胞免受冻存时冰晶的损伤,大大提高了细胞的复苏率和活力,可用于细胞长期保存。该产品配方成分明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。
与传统冻存液相比,本产品不仅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感染物质给冻存带来的影响与风险,同时,可省去繁琐费时的程序降温过程,细胞可重悬于本产品后直接置于-80℃冰箱长期保存,或次日转移到液氮完成整个冻存过程。
产品性质
该产品已通过严格的内毒素、渗透压、pH 测试和无菌检测(细菌、真菌和支原体检测)。成分明确,极大降低批次间差异
产品特点
1、即用型细胞冻存液——优化的wan全营养成分配方,不需要逐次用多种试剂自行配制冻存液
2、直接冻存于-80℃冰箱,长期保存(>5 年),不需要程序性降温
3、高安全性,病毒、病菌和支原体等污染可能性低——不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌病毒和支原体等污染
使用方法
使用方法
一 冻存细胞复苏步骤
  1. 选择处于指数生长期的细胞,按照常规方法收集贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。

  2. 1000 rpm-2000 rpm,离心 5 分钟,收集培养细胞沉淀,弃上清液。

  3. 加入适量 4℃预冷的 BIOHUB 无血清细胞冻存液重悬细胞,制成细胞悬液。 (按照细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存液的量,推荐冻存密度:1x106 至 5x106cells/mL。)

  4. 将细胞悬液分装至已标记的冻存管中,建议每管 1mL 或 1.5mL。

直接将细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。如果想放入液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少 12 小时,方可移至液氮罐中长期保存。
二  冻存细胞复苏步骤
  1. 在 15 mL 离心管中加入 5-10 mL 平衡至室温的wan全培养基。

  2. 从-80℃冰箱/液氮中取出冻存的细胞,立即放入 37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中,迅速解冻。

  3. 将冻存管中的细胞悬液逐滴转移至预先准备好的含wan全培养基的离心管中,1000 rpm-1500 rpm,离心 5 分钟,收集细胞沉淀,弃上清(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)。

  4. 加入适量平衡至室温的wan全培养基重悬细胞,接种到事先准备好的培养容器中,轻轻摇晃培养容器,使细胞分布均匀。

  5. 镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法进行细胞常规培养。培养 5-24h 后,观察细胞状态,可视情况更换鲜细胞培养液。

实验案例分析
1.选择处于对数生长期的四种细胞,按照常规方法收集细胞于离心管中。
2.1000 rpm,离心 5 分钟,收集培养细胞沉淀,弃上清液。
3.加入适量 4℃预冷的 BIOHUB 无血清细胞冻存液、T 公司冻存液、X 公司冻存液分别重悬细胞,制成细胞悬液。冻存密度为 1x106 cells/mL。
4.将细胞悬液分装至已标记的冻存管中,每管 1mL,放入-80℃冰箱中,冷冻保存。
5.冻存 6 个月后,进行细胞复苏,对复苏后的细胞进行台盼蓝染色,统计细胞存活率。

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细胞冻存 6 个月后复苏,对复苏后的细胞进行台盼蓝染色,统计细胞存活率

运输及保存方法
保存:短期:2-8℃ 6 个月;长期-20℃保存,24 个月。
运输:冰袋运输。


注意事项
  1. 本产品可-30℃至-10℃保存,若长期不用,再次使用时,请在 2-8℃或室温(22-25℃,不超过 4小时)融化 ;

  2. 避免反复冻融;

  3. 使用此无血清细胞冻存液冻存细胞后,应尽量减少冻存细胞在外存放时间,尽快移入-80℃超低温冰箱长期保存;

  4. BIOHUB 无血清细胞冻存液(药用级)含有 DMSO,部分对 DMSO 敏感的细胞、淋巴细胞或干细胞冻存,建议使用本产品对其进行试验性冻存、复苏、培养,确认性能后再进行正式冻存;

  5. 该产品在室温条件下放置的时间不宜过长,以免影响冻存效率;

免责声明: 本公司将不为任何不正当使用此产品所发生的意外负责;为了您的健康安全,请规范操作,穿戴实验服与手套开展实验;
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及治疗


货号品名规格品牌
78EC10001-100ml无血清细胞冻存液100mlBIOHUB
78EC10001-500ml无血清细胞冻存液500mlBIOHUB






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