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2x 长片段PCR 扩增 预混液( long fragment PCR Master Mix)说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:122

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使用方法
  1. 充分溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液。将2x 长片段PCR 扩增 预混液( long fragment PCR Master Mix)置于冰浴上或冰盒内。参考下表在冰上设置PCR反应:

Component20uL RXN25uL RXN50uL RXNFinal Concentration
2x 长片段PCR 扩增 预混液10uL12.5uL25uL1 ×
10uM Forward Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
10uM Reverse Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
Template DNAvariablevariablevariablevariable
Nuclease-Free Waterto 20uLto 25uLto 50uL
2 . 不同模板最佳反应浓度有所不同,反应体系推荐模板使用量可参见下表。
Template DNA20uLRXN25uL RXN50uL RXN
Genomic DNA4ng-0.4ug5ng-0.5ug10ng-1ug
Plasmid or Vrial4pg-4ng5pg-5ng10pg-10ng
cDNA4pg-0.4ug5pg-0.5ug10pg-1ug
3. 用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。
反应程序
1 .退火温度应根据引物Tm值进行调整(50-72℃)。
2. 延伸时间需根据扩增片段的长度和复杂性进行调整。
3. 各设置好的PCR反应管置于PCR仪上,开始PCR反应。
STEPTEMPTIME
Initial Denaturation98°C30 sec
25–35 Cycles98°C10 sec

50–72 °C15 sec

72°C15-30 sec/kb
Final Extension72°C5 min
Hold4–10 °C
运输及保存方法
-20℃ 保存 一年 干冰运输


货号品名规格品牌
78DC10152-1ml2x 长片段PCR 扩增 预混液(long fragment PCR Master Mix)1mlBIOHUB
78DC10152-5ml2x 长片段PCR 扩增 预混液(long fragment PCR Master Mix)5mlBIOHUB
78DC10152-3*5ml2x 长片段PCR 扩增 预混液(long fragment PCR Master Mix)3*5mlBIOHUB







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