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R-PE 藻红蛋白

简要描述:R-PE 藻红蛋白是从红藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物su、亲和素和各种单克隆抗体结合起来制成荧光探针,用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞荧光测定等抗体荧光标记以及活体成像应用等诊断及生物工程技术。

  • 产品型号:78GD10007
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-11-30
  • 访  问  量:2031

详细介绍

品牌BIOHUB供货周期两周
应用领域生物产业
R-PE 藻红蛋白产品描述
藻红蛋白是从红藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物su、亲和素和各种单克隆抗体结合起来制成荧光探针,用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞荧光测定等抗体荧光标记以及活体成像应用等诊断及生物工程技术。
R-PE 藻红蛋白产品性质
分子量:约 240,000 道尔顿
组成:蛋白的亚基组成为(alpha-beta)6gamma。每个alpha-亚基和 beta-亚基约 20,000 道尔顿,每个
gamma 亚基约 30,000 道尔顿。
纯度: Amax/A280 > 5.5
激发波长: :450-500 nm
发射 波长: :575 ± 5 nm
形态:硫酸铵沉淀
产品特点
1、该产品为硫酸铵沉淀,将其置换至20mM 磷酸盐缓冲液中使用。
2、在较宽的 pH 范围内具有较宽的吸收光谱,比较容易选择合适的激发波长,从而得到高效荧光发射,
且激发时有特异的荧光发射峰;
3、吸光度和荧光量子产率很高,荧光强而稳定,灵敏度高;
4、具有较小的荧光背景,不易淬灭,荧光保存期较长;
5、易与其他分子交联结合,非特异性吸附少;
6、chun天然海洋生物提取,无任何毒副作用,不含放射性,操作使用非常安全。易与抗体、生物su、
亲合素、 免疫蛋白等物质结合,制成荧光探针。
使用方法
使用方法
抗体标记(仅供参考)
试验材料:
藻红蛋白:分子量约 240000 道尔顿;PD-10 柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25M) ,安玛西亚 Amersham公司产品,产品目录号 No. 17-0851-01; NAP5 柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25 DNA grade), 安玛西亚Amersham 公司产品,产品目录号 No 17-0853-02;琥珀酰亚胺-4-(N- 甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC),Pierce 公司,产品目录号 No.22360;N-乙基马来酰胺(NEM),Sigma 公司,产品目录号 E-1271;二甲基亚砜(DMSO),Aldrich 公司,产品目录号 No. 27,685-5。
试验方法:
1、藻红蛋白溶液
将藻红蛋白沉淀复溶为溶液,用脱盐柱或超滤管除盐并将其缓冲液置换为20mM 磷酸盐缓冲液,调整藻红蛋白的最终浓度为5-10毫克/毫升。
2、藻红蛋白的衍生化
将琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于无水二甲基亚砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻红蛋白添加 11 微升的琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)
(SMCC),铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟,使藻红蛋白分子上的氨基与琥珀酰胺反应生成衍生化的藻红蛋白。交换缓冲液预先平衡凝胶层析柱,将衍生化的藻红蛋白过柱,收集藻红蛋白峰。
3、抗体的处理
二硫苏糖醇(DTT)溶解于蒸馏水中,配制成 1 摩尔/升的二硫苏糖醇(DTT)母液,调整抗体的浓度,使其浓度至少为 4 毫克/毫升。
每毫升抗体溶液中加入 20 微升的二硫苏糖醇(DTT)母液,室温静置反应 40 分钟,将抗体的二硫键打开形成巯基。交换缓冲液预先平衡凝胶柱,将反应液过柱,收集抗体部分。
4、藻红蛋白和抗体的共价交联
每毫克抗体加入 3.2 毫克的琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻红蛋白,铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟,使藻红蛋白分子上的马来酰亚胺基和抗体上的巯基实现共价交联。
10 毫克的 N-乙基马来酰胺(NEM)溶解于 1.0 毫升的无水二甲基亚砜(DMSO)中制成 N-乙基马来酰胺(NEM)母液(现配现用)。每毫克抗体中加入 3.4 微升N-乙基马来酰胺(NEM)母液,铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟, 反应后,使抗体上的巯基封闭。
5、交联物的存储
将交联物于存储缓冲液中透析后保存于2-8℃。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作!
本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
运输及保存方法
储存条件:2-8°C 避光保存,勿冷冻。
稳定性:在适宜条件下至少可以储存12个月。

 

 

 

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