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Ec UDG酶

简要描述:Ec UDG酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 链的尿mi啶碱基和糖磷酸骨架的 N-糖苷键,释放游离尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)来源于大肠杆菌 ung 基因,经重组表达与多步蛋白纯化而得。该酶分子量为 25KDa,催化含尿mi啶的单链和双链 DNA 释放游离尿mi啶,对 RNA 无活性。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-11-30
  • 访  问  量:1477

详细介绍

品牌BIOHUB供货周期两周
应用领域生物产业
Ec UDG酶产品描述

UDG 酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 链的尿mi啶碱基和糖磷酸骨架的 N-糖苷键,释放游离尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)来源于大肠杆菌 ung 基因,经重组表达与多步蛋白纯化而得。该酶分子量为 25KDa,催化含尿mi啶的单链和双链 DNA 释放游离尿mi啶,对 RNA 无活性。

UDG 酶常用于止 防止 PCR 扩增产物的交叉污染,其作用原理基于:在 PCR 反应中以 dUTP 替代dTTP 掺入 DNA 中,形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物,UDG 能选择性断裂单链和双链 DNA中 U 碱基的糖苷键,降解 PCR 扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。由于大肠杆菌 UDG 经高温失活,降温到低温后,活性会部分恢复;因此不建议本酶用于 防止 PCR 扩增产物的交叉污染。建议利用本公司的热敏 UDG(目录号 AE0402)进行 防止 PCR 扩增产物的交叉污染。

Ec UDG酶产品应用

主要应用于 PCR 扩增产物的防污染。它的作用原理基于:在 PCR 反应中以 dUTP 替代 dTTP掺入 DNA 中,形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物,UDG 能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U碱基的糖苷键,降解 PCR 扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。

活性定义

37℃反应条件下,每分钟催化 60 pmole 尿mi啶碱基从含尿mi啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为 1 U。

质量控制

无内切酶活性:50 U 的本酶和 1 μg 的 pBR322 DNA 在 37℃下反应 2 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化。

运输与保存

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作!

本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

备注

长期储存 ( 非频繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃;每天或每周使用: -20℃。尽量避免多次冻融,切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。

UDG 可以在 PCR 反应前清除不慎污染的 U-DNA 分子,对于某个 PCR 扩增反应,整个实验室必须在所有的 PCR 反应中添加 dUTP,使所有扩增产物都成为 U-DNA。如仅某次 PCR 扩增反应使用 dUTP,T -DNA 仍积累,这个抗污染系统也难以起到wan全的作用。

UDG/dUTP 系统是 PCR 试剂专用的一种防污染措施,为了防止 PCR 产物的污染,尤其是在临检实验室中反复扩增同一片段时,必须严格规范实验室的区域划分和操作。

如果经过换房间、紫外照射、DNase 消化等措施后,依然对某个片段存在污染,建议在不同的扩增区重新设计引物,以错开污染片段。

大肠杆菌 UDG 酶的反应温度可以在 37℃-50℃ 的范围内变化,建议在 37 度反应,也可根据实验需要在 37-50 ℃范围内自由调整反应温度。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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