线性聚乙烯亚胺PEI MW40000(Polyethylenimine Linear,MW 40000;PEI 40K)是一种优秀的瞬时性转染试剂,在生物实验和基因工程中有着广泛的应用。为了确保其性能和延长使用寿命,日常维护至关重要。以下是对
线性聚乙烯亚胺PEI MW40000的日常维护建议:
一、储存条件
1.温度:线性聚乙烯亚胺PEI MW40000应在室温下保存,或可置于4℃以延长保存周期。储存液在4℃下有效期为3个月,但不建议进行冻存,因为冻存可能会降低其活性。
2.容器:建议使用无菌HDPE或聚丙烯储存瓶,并确保容器密封良好,以防止空气中的氧气、水分或其他杂质影响其性能。
二、溶液配制
1.溶剂选择:该转染试剂易溶于冷水和室温水,不溶于通用有机溶剂(如乙醇、丙酮和四氢呋喃)。因此,在配制溶液时应使用Milli-Q?超纯水或其他相当级别的生物用水。
2.pH调节:配制溶液时,需用NaOH调整pH至6.90~7.10之间。如果pH突然超过7.10,应使用1N盐酸重新调整pH回落至6.90~7.10之间。
3.过滤除菌:溶液配制完成后,应使用0.1μm或0.2μm PES滤膜真空过滤器进行过滤除菌,以确保无菌状态。
三、使用注意事项
1.细胞状态:使用线性聚乙烯亚胺PEI MW40000进行转染时,应确保细胞处于良好的生长状态,且细胞密度适中(通常为70%~80%)。
2.转染比例:质粒DNA与PEI的比例对转染效率有重要影响。应根据细胞类型和实验条件进行优化,以达到最适比例。通常,质粒(μg)与试剂(μL)的参考配比区间为1:0.5~1:3。
3.混合方式:在配制DNA-PEI复合物时,应避免涡旋,以免破坏DNA结构。应将DNA稀释液与PEI溶液轻轻混匀,并在室温下孵育一段时间(通常为10~20分钟),以形成稳定的复合物。
四、定期检查与维护
1.检查有效期:定期检查转染试剂的有效期,并在有效期内使用完毕。
2.观察溶液状态:如果发现溶液出现浑浊、沉淀或颜色变化等异常情况,应立即停止使用,并重新配制新的溶液。
3.记录使用情况:记录每次使用转染试剂的日期、用量和实验结果等信息,以便进行后续分析和改进。
线性聚乙烯亚胺PEI MW40000的日常维护包括储存条件的控制、溶液的正确配制、使用注意事项的遵循以及定期的检查与维护。这些措施有助于确保其性能和延长使用寿命,从而提高实验效率和准确性。