咨询电话:13308436663

当前位置:首页  >  技术文章  >  大肠杆菌HMS174 (DE3)说明书

大肠杆菌HMS174 (DE3)说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:140

大肠杆菌HMS174 (DE3)说明书

11.png

产品描述
本品为大肠杆菌HMS174 (DE3)(基因型:K-12,F-,λDE3[lacI,lacUV5-T7gene1,ind1,sam7,nin5],recA1,hsdR19,IN(rrnD-rrnE)1,rph-1,rpoB331(rifR))制作的高效感受态,该菌株源于大肠杆菌K12菌株,含有RecA突变。对于能够导致DE3噬菌体损失的特定基因,该菌株能够稳定表达这种基因。DE3是溶源性的λDE3,带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝,可在IPTG诱导下表达T7 RNA聚合酶。HMS174 (DE3)具有完整的乳糖代谢途径,故在诱导蛋白表达时,可以用乳糖同时作为唯yi碳源和诱导剂,因此不需要IPTG作为诱导剂,成本比BL21(DE3)以葡萄糖做碳源,以ITPG做诱导剂的表达模式低,适合工业级大规模表达外源蛋白。该菌株同时具有利福平抗性。HMS174 (DE3)是染色体上携带lacUV-T7 RNA聚合酶基因的专门用于蛋白表达的K-12菌株。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体,与BLR(DE3)类似。经pUC19 质粒(2686bpAmpR)检测转化效率>1×107 cfu/μg DNA
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
使用方法
使用方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。



货号品名规格品牌
78BDC10020-10×100uLHMS174 (DE3)10×100uLBIOHUB
78BDC10020-50×100uLHMS174 (DE3)50×100uLBIOHUB



扫码关注

邮箱:xs1@78bio.com

地址:上海市浦东新区川沙新镇6619号

版权所有©2024 上海起发生物科技有限公司 All Rights Reserved    备案号:沪ICP备2022022359号-2    sitemap.xml    管理登陆    技术支持:化工仪器网