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RNase A, from bovine pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:68

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产品描述

核糖核酸酶A(Ribonuclease A,常用缩写RNase A),来源于牛胰,一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7 kDa(氨基酸序列)为高度专一性核酸内切酶。作为一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。具体来说,切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键,从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG)。RNase A切割单链RNA活性最高,推荐工作浓度为1-100 μg/mL,兼容于各种反应体系。低盐浓度(0-100 mM NaCl),可用来切割单链RNA,双链RNA,以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。然而,高盐浓度(≥0.3 M),RNase A仅特异性切割单链RNA。

核糖核酸酶A(RNase A)最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA,此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一,可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。另外,本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。

产品性质

CAS号(CAS NO.)

9001-99-4

分子量(Molecular Weight)

~13.7KD

外观(Appearance)

白色冻干粉末

来源(Source)

牛胰腺

最佳PH(Optimal temperature)

7.6(活性范围6-10)

最适温度(Optimal temperature)

60 ℃(活力范围15-70℃)

激活剂(Activator)

钠盐、钾盐等

抑制剂(Inhibitor)

核酸酶抑制剂

失活方法(Inactivation)

加热不会失活,建议用离心柱或者酚氯仿抽提来充分去除

溶解性(Solubility)

溶于水(10 mg/mL)

酶活力(Activity)

≥60 Kunitz units/mg

等电点(Isoelectric point)

9.6

使用方法使用方法

储存液制备

【注】:此为RNase A储存液配制的常用方法之一,也可以根据实验室传统的方法,或者参考文献资料使用其他方法制备储存液(如直接溶于10 mM Tris-Cl, pH7.5或者Tris-NaCl溶液)。

1)将RNase A溶解在10mM 醋酸钠(pH5.2)中,制备成终浓度10 mg/mL 的RNase A 储存液;

2)100℃加热15 min;

3)冷却到室温,加入1/10体积的1 M Tris-HCl(pH7.4),调其pH至7.4(如:5 mL 10 mg/mL的RNase 储存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4);

4)分装于-20℃冻存,可稳定保存长达2年。

【注】:在中性条件下煮沸RNase A溶液,会有RNase沉淀形成;在更低的pH下将其煮沸,如有沉淀可以观察到,可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀,可通过高速离心(13,000 rpm)去除杂质,然后分装冻存。

运输及保存方法冰袋运输。-20℃干燥保存,有效期2年。

注意事项

1)RNase A会强吸附在玻璃器皿上,建议溶液装到塑料离心管内。

2)对于同时操作完整RNA实验的研究人员,一定要谨防RNase A引入干扰试验结果的准确性。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4)本产品仅作科研用途!



货号品名规格品牌
78DC10149-100mgRNase A, from bovine pancreas核糖核酸酶A,来源于牛胰腺100mg

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