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HE染液说明书

更新时间:2023-10-24      点击次数:72

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产品描述
HE染色,即苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色,是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用zui广泛的技术方法。苏木素染液为碱性,主要使细胞核内的染色质、胞质内的核酸着蓝色至蓝紫色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色可用于观察比较正常组织与病变组织的形态结构,可初步确定或鉴别病变组织、细胞中出现的异常物质。经本产品HE染液染色的组织或细胞,细胞核呈蓝色至蓝紫色,细胞浆呈红色,胞浆与胞核对比鲜明。
产品组分

组成

Component

78GD10081-100mL

78GD10081-500ML

苏木素染液

100 mL

500 mL

伊红染液(醇溶)

100 mL

500 mL

使用方法
使用方法

1. 样本前处理

(1) 对于石蜡切片:切片依次经二甲苯脱蜡10 min,更换新鲜的二甲苯脱蜡10 min,无水乙醇 5min,新鲜无水乙醇5 min,90%乙醇5 min,75%乙醇5 min,自来水洗。

(2) 对于冰冻切片:-20℃保存的冰冻切片需静置5-10 min恢复至室温。如需固定,则经所需固定液室温后自来水洗。

2. HE染色

(1) 苏木素染色:上述处理好的切片,进入苏木素染液染色3-5 min,自来水洗;

(2) 分化:切片经苏木素分化液2-5 s,自来水流水充分冲洗;

(3) 返蓝:苏木素返蓝液返蓝2-5 s,自来水流水充分冲洗;

(4) 伊红染色:切片依次经85%、95%梯度乙醇脱水,各5 min。然后进入伊红染液(醇溶)中染色5 min,经两次无水乙醇脱水各5 min;

(5) 透明:切片再经新鲜无水乙醇脱水5 min,二甲苯透明5 min,更换新鲜的二甲苯再透明5 min。

(6) 封片:滴加中性树胶进行封片。

注意事项

1. 染色后用特定溶液将组织中过多结合的染液脱去,这个过程称为分化作用,所用溶液称为分化液。在HE染色种常用低浓度盐酸作为分化液,因为酸能破坏苏木素的醌型结构结构,使色素与组织分离而褪色。组织在经苏木素染色后,必须经过分化去除组织中过多结合及非特异性吸附的染料,才能进行伊红染色,确保细胞核与胞浆显色分明。可使用78NB10002苏木素分化液。分化过程中,根据组织切片厚度、组织类型等结合镜下观察适当调整分化时间。


2. HE染色中苏木素染色后的返蓝很重要。苏木素在酸性条件下为离子状态,呈红色;在碱性条件下呈蓝色。组织切片经酸性分化液分化后呈红色或粉红色,需立即水洗终止分化,再用弱碱性溶液使苏木素,这个过程就是返蓝作用。如果没有专用的返蓝液,用温水浸洗也能使细胞核返蓝,只是所需时间略长。推荐78NB10003苏木素返蓝液。

3. 苏木素及伊红染色程度可以根据染色需要进行调整染色时间。

4. 苏木素染液可重复使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分挥发。当组织或细胞着色明显偏浅或颜色异常时请更换新的染液。

5. 用于染色后脱水的无水乙醇纯度需大于99.9%。如果乙醇含水,伊红会褪色导致染色不均匀。

6. 伊红染液(醇溶)可反复使用数次,当组织着色明显偏浅时建议更换新的染液。

7. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。



货号品名规格品牌
78GD10081-100mLHE染液100mLBIOHUB
78GD10081-500mLHE染液500mLBIOHUB




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